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     Buffpro 300与Sigma公司的ProClin 300或陶氏化学(Dow Chemical Company)的PROCLIN 300属于同类产品，效果一致；是一种广谱、高效、稳定、低毒的抑菌剂(antimicrobial, microbicide)和防腐剂(preservative)，可用于一抗、二抗、封闭液、抗体稀释液、洗涤液、生化缓冲液、水浴锅用水、清洗剂、化妆品等的抑菌防腐。

      Buffpro 300主要活性成分是5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one, CMIT)和2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(2-methyl-4-isothiazloin-3-one, MIT)的3:1混合物。这两种成分可以抑制微生①物生长并促使微生物死亡。其原理是，CMIT/MIT与细胞膜接触后，可立即渗透到☉细胞膜内并抑制细胞代谢的关◤键环节三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle)过程中的α-酮戊二★酸脱氢酶(ketoglutarate dehydrogenase)、琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase)和NADH脱氢酶(NADH dehydrogenase)的活性，同时，其它的一些重要的酶如丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase)、乳■酸脱氢酶(lactate dehydrogenase)、乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase)也可以被抑制，从而抑制细胞代谢及大分子的合〖成，引起细胞内能量水平迅速下降，最终由于卐能量体系的崩溃、细胞不能进行正常的合成代谢而生长抑制或死亡。细菌和真菌拥有全部或部分三羧∑　酸循环，因此本产品对细菌和真菌都适用，具有非常广谱的抗菌谱，而且本产品具有多个☆脱氢酶作用位点，因此大大降低了因变异▼而产生的微生物的耐药性。

      本产品高效、稳定、低毒、环保。本产品起效〖时间快，适用pH范围广(pH2.5~8.5)，在各种缓冲溶液如Tris、TES或HEPES等pH7左右的溶液中化学稳定性好；在推荐温度下，未开封产ω　品可以稳定保存三年以上；与水可】以任意比混合，适用于在水性溶液中添加本产品，在水溶液中的稳定性好，对试剂的颜色无干♀扰；本产品毒性远远低于硫柳汞和叠氮化钠，且有良好的生物降解能力，不会对环境造成【污染。

Buffpro系列产品的主要特点和差异如下：

产品编号	G6248	G6258	G6268
产品名称	Buffpro 150	Buffpro 300	Buffpro 950
活性成分	1.5% CMIT/MIT	3% CMIT/MIT	9.5% MIT
基质	水	丙二醇	水
pH值	1.7-3.7	2.0-6.0	3.0-6.0
适用pH范围	2.5-8.5	2.5-8.5	2-12
推荐使用浓√度	0.05-0.10%	0.03-0.10%	0.05-0.10%
保质期	4年	3年	3年
适用溶液	优先推荐用于酸性溶液、化妆品、洗涤剂及家庭用品等	优先推荐用于酸性◤到弱碱性的溶液，如各种缓冲液、生化试剂、校准品等	优先推荐用于pH>9.5的碱№性溶液，及血细胞或血型检验试剂的保存

实验数据

1. Buffpro系列抑菌剂对■酶活性的影◎响

1.1对辣根过氧化物酶(HRP）活性的影响
      向0.2ml的PCR管中加入100ul GBCBIO公司的TMB显色液（货号G4308），再加╱入终浓度为0%、0.05%与0.5%的Buffpro 150、Buffpro 300、Buffpro 950，最后加入同样浓度的HRP标记的二抗，显□　色同样的时间后加入100ul 显△色终止液（货号G1108）测定450nn吸光值，显示高至0.5%的Buffpro系列抑菌剂对HRP活性物影响。

1.2 对聚合酶（Taq）活性的影响
向qPCR反应体系中加入终∏浓度为0%、0.05%与0.5%的Buffpro系列抑菌剂，实验显示高至0.5%的Buffpro系列抑菌剂对PCR无明∮显影响。

样品	基因1	基因2
无抑菌剂	19.316	22.304
	19.290	22.426
PC-150 （0.05%）	18.902	22.216
	19.090	22.137
PC-150 （0.5%）	19.220	22.534
	19.332	22.645
PC-300 （0.05%）	19.585	22.615
	19.480	22.551
PC-300 （0.5%）	19.301	22.393
	19.237	22.330
PC-950 （0.05%）	19.121	22.374
	19.020	22.518
PC-950 （0.5%）	19.498	22.449
	19.401	22.354

2. Buffpro 300 抑菌效果测＠试

2.1. 对金黄色葡萄球菌的抑制效果（细菌）

培养基高压灭菌后，冷却〓并添加一定量的Buffpro 300后到平板。凝固后接种同样菌量的金黄色葡萄球菌，37℃培养18h。结果如▂下图：

编号  Buffpro 300（V/V）  结果   J0 0  不可计数   J1 0.01% 未检出   J2 0.02%   未检出   J3 0.05%  未检出

2.2.  对█白色念珠菌的抑制效果（真菌）

培养基高压灭菌后，冷却并添♀加一定量的Buffpro 300后到平板。凝固后接种同样菌量的白色念珠菌，37℃培养18h。结果如下〇图：

编号  Buffpro 300（V/V）  结果   N0 0  不可计数   N1 0.01% 未检出   N2 0.02%  未检出   N3 0.05%  未检出

2.3. 对黑曲霉的抑制效果≡（霉菌）

培养基高压灭菌后，冷却并添々加一定量的Buffpro 300后到平板。凝固后接种同样菌〒量的霉菌，37℃培养18h。结果如下图：

编号  Buffpro 300（V/V）  结果    H0 0  不可计数    H1 0.01% 未检出    H2 0.02%  未检出    H3 0.05%  未检出

2.4. 结论

通过对典型菌种的抑制培养，显示低至0.01%Buffpro 300能够＠ 对细菌、真菌与霉菌有效抑制。