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     Buffpro 950是一种广谱、高效、稳定、低毒的抑菌剂(antimicrobial, microbicide)和防腐剂(preservative)，可用于一抗、二抗、封闭液、抗体稀释液、洗涤液、生化缓冲液、水浴锅用水、清洗剂、化妆品等的抑菌防腐。本产品与Sigma公司的ProClin™ 950属于同类产品，效果一致。

      Buffpro 950主□要活性成分是2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(2-methyl-4-isothiazloin-3-one, MIT)。MIT可以抑制微生物生长并促使微生物死亡。其原理是，MIT与细胞膜接触后，可立即渗透到细胞膜内并〖抑制细胞代谢的关键环节三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle)过程中的α-酮∮戊二酸脱氢酶(ketoglutarate dehydrogenase)、琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase)和NADH脱氢酶(NADH dehydrogenase)的活性，同时，其它的一些重要的酶如丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase)、乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase)也可以被抑制，从而抑制细胞代谢及大分子的合成，引起细胞内能量水平▲迅速下降，最终由于能量体系的崩溃、细胞不能进行正常的合成代谢而生长抑』制或死亡。细菌和真菌拥有全部或部分三羧酸循环，因此本产品对细菌和真菌都适用，具有非常广谱的抗菌谱，而且本产品具有多个脱氢酶作用位点，因此大大降▓低了因变异而产生的微生物的耐药性。

      本产品起效时间快，适用pH范围广(pH2~12)，在各种缓冲溶液▽如Tris、TES或HEPES等pH7左右的溶液中化学稳定性好；在推荐温度下，未开封产品可以稳定保存三年以上；与水可以任意比混㊣合，适用于在水性溶液中添加本产品，在水溶液中的稳定性□　好，对试剂的颜◥色无干扰；本产品毒性远远低于硫柳汞和叠氮化钠，且有良好的生物降解能力，不会对环境造成污染。

Buffpro系列产品的主要特点和差异如下：

产品编号	G6248	G6258	G6268
产品名称	Buffpro 150	Buffpro 300	Buffpro 950
活性成分	1.5% CMIT/MIT	3% CMIT/MIT	9.5% MIT
基质	水	丙二醇	水
pH值	1.7-3.7	2.0-6.0	3.0-6.0
适用pH范围	2.5-8.5	2.5-8.5	2-12
推荐↑使用浓度	0.05-0.10%	0.03-0.10%	0.05-0.10%
保质期	4年	3年	3年
适用溶液	优先推荐用于酸性溶液、化妆品、洗涤剂及家庭用品等	优先推∩荐用于酸性到弱碱性的溶液，如各种缓冲液、生化试剂、校准品等	优先推荐用于pH>9.5的碱性溶◥液，及血细胞或血型检验试剂的☆保存

实验数据

1. Buffpro系●列抑菌剂对酶活性的影◆响

1.1对辣根过氧化物酶(HRP）活√性的影响
      向0.2ml的PCR管中加入100ul GBCBIO公司的TMB显色液（货号G4308），再加入终浓度为0%、0.05%与0.5%的Buffpro 150、Buffpro 300、Buffpro 950，最后加入同样浓度的HRP标记的︻二抗，显色同样的时间后加入100ul 显色终止液（货号G1108）测定450nn吸光值，显示高至0.5%的Buffpro系列抑菌剂对HRP活性物影响。

1.2 对聚合酶（Taq）活性的影响
向qPCR反应体系中】加入终浓度为0%、0.05%与0.5%的Buffpro系列抑菌剂，实验显示高至0.5%的Buffpro系列抑菌剂对PCR无●明显影响。

样品	基因1	基因2
无抑菌剂	19.316	22.304
	19.290	22.426
PC-150 （0.05%）	18.902	22.216
	19.090	22.137
PC-150 （0.5%）	19.220	22.534
	19.332	22.645
PC-300 （0.05%）	19.585	22.615
	19.480	22.551
PC-300 （0.5%）	19.301	22.393
	19.237	22.330
PC-950 （0.05%）	19.121	22.374
	19.020	22.518
PC-950 （0.5%）	19.498	22.449
	19.401	22.354

2. Buffpro 950 抑菌效果测试

2.1. 对金黄色葡萄球菌的抑制效果（细菌）

培养基高压灭ξ菌后，冷却并添加一定量的↘Buffpro 950后到平板。凝固后接种同样菌量的金黄色葡萄球菌，37℃培养18h。结果◥如下图：

编号  Buffpro 950（V/V）  结果   J0 0  不可计数   J7 0.05% 未检出   J8 0.1%   未检出   J9 0.5%  未检出

2.2.  对白色念珠菌的抑制效果（真菌）

培养基高压灭☉菌后，冷却并添加一定量的Buffpro 950后到平板。凝固后接种同样菌量的白色念珠菌，37℃培养18h。结果如下图：

编号  Buffpro 950（V/V）  结果   N0 0  不可计数   N7 0.05% 未检出   N8 0.1%  未检出   N9 0.5%  未检出

2.3. 对黑曲霉的抑制效果（霉菌）

培养基高压灭菌后，冷却并添加一定量的Buffpro 950后到平板。凝固后接▓种同样菌量的霉菌，37℃培养18h。结果如下图：

编号  Buffpro 950（V/V）  结果   H0 0  不可计数   H7 0.05% 未检出   H8 0.1%  未检出   H9 0.5%  未检出

2.4. 结论

通过对典型菌种的抑制培养，显示低至0.05%Buffpro 950能够对细菌、真菌与霉菌有效抑制。